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网状纤维

时间:2007-12-23  作者:丁伟  阅读:26597次

           Gomori氏银氨液配制法
  配法:
  10%硝酸银              10 ml        
  10%氢氧化钾             20 ml
     将3毫升10%硝酸银溶液与1毫升10%氢氧化钾溶液混合,马上产生黑色沉淀,加蒸馏水100毫升,摇晃,倒去棕黑色的上清液,留下黑色沉淀物(5毫升),反复几次,直至加下去的蒸馏水不再混浊为止,然后,倒去上清液(留5毫升),滴加浓氨水,直至黑色沉淀溶解(边滴加,边摇晃,氨水不能过量),如氨水过量,可再滴加10%硝酸银,直至出现黑色沉淀。最后,加蒸馏水至40毫升,置于棕色瓶中,4度冰箱内保存备用。此液以新配效果最好,4度冰箱内可保存15~30天。
  染色步骤:
1.切片脱蜡至蒸馏水。
2.放入0.25%高锰酸钾水溶液5分钟。
3.蒸馏水洗。
4.2.5%草酸2~5分钟。(切片变白就可以)
5.蒸馏水洗2次。
6.放入2%铁明矾水溶液10分钟。
7.蒸馏水洗多次。(要洗干净)
8.氨银液浸染3~5分钟。(根据室温)
9.蒸馏水浸洗2次。(快速)
10. 放入10%福尔马林液中还原3分钟.
11. 自来水洗,再用蒸馏水洗。
12. 用0.2%氯化金水溶液调色5~10分钟,蒸馏水洗。。
13. 2%硫代硫酸钠水溶液固定1分钟。(可不用)
14. 水洗,酒精脱水,二甲苯透明,树胶封固。
结果:网状纤维黑色,胶原纤维深黄色。

 注意事项: 
1、使用的玻璃器皿都必须干净,并用蒸馏水冲洗,全过程最好用双蒸水。
2、所用的试剂如硝酸银,氢氧化钠和氢氧化钾等的质量要纯。
3、配制银氨液时加浓氨水要适量,边加边摇动使沉淀物溶解至肉眼仅能见到一些微粒为止,加入过多,容易导致脱片。
4、切片经硫酸铁铵液和银氨液作用后水洗时间要恰当。
5、配好后的银氨液很敏感,受光或空气作用后均易解离析出银盐,故应用棕色玻璃瓶盛装并置于冰箱保存。 
6、在经10%中性甲醛液还原流水冲洗后,放在显微镜下观察。如浸银过度,可用高锰酸钾水溶液分化短时再经流水冲洗,如浸银不足,可用蒸馏水洗后,再滴上银氨液,有可能可以补救。




参考文献:
1、王伯沄,李玉松,黄高升,张远强《病理学技术》
2、凌启波《实用病理特殊染色和组化技》
3、刘介眉等《病理组织染色的理论方法和应用》
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