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免疫组化阴性对照---同型对照(Isotype Control)

本主题由 dingwei 于 2007-12-25 16:18 加入精华

回复 #20 shanghainese 的帖子

看样子你没有完全理解.
我们这里讨论的在免疫组化中设立阴性对照,isotype control------阴性对照. 在阴性对照片里它的一抗是isotype control reagent.  如果一抗的亚型是小鼠(mouse) IgG2a, 阴性对照片里它的一抗就用小鼠(mouse) IgG2a isotype control reagent(有专门的同型对照试剂买)来代替原来的一抗。isotype control reagent(同型对照试剂)不因该与组织中的任何细胞反应。所以及施加了二抗抗IgG2也不会有假阳性
我同意你的看法,

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谢谢shanghainese

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阴性对照

阴性对照一方面可以用一抗的同源血清来代替一抗,另一方面可以用过量的抗原来做预吸附实验,用抗原将抗体全部封闭以后再做实验,来做阴性对照!

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引用:
原帖由 柳玉山 于 2007-11-17 11:05 发表
阴性对照一方面可以用一抗的同源血清来代替一抗,另一方面可以用过量的抗原来做预吸附实验,用抗原将抗体全部封闭以后再做实验,来做阴性对照!
“用过量的抗原来做预吸附实验,用抗原将抗体全部封闭以后再做实验,来做阴性对照”。

这种方法不能代替同型对照(isotype control)。

它只能说明抗体与抗原起反应了。但是做为免疫原的抗原有很多,有的是native protein, 有的是 recombinant protein, 有的是peptide, 有的是denatured protein。抗体能与一种类型抗原反应,并不一定能与其他类型的抗原反应。

再者,抗体能与抗原反应并不能说明这个抗体的特意性,也不能说明这个抗体的 background。

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版主有性格!!!我喜欢!!!

因为要做免疫组化方面的实验,注册了这个论坛,看了版主的回帖,很有性格啊!!!说句不好听的话,真正做医学基础的,有几个英语不好的?!(当然我是做临床的,英语差点也是可以原谅的...主要是对免疫组化实验实践几乎为零,我先坦白,承认自己的无知........)我完全相信版主的英语水平能够阅读任何高难度的英文论文,但是我也不喜欢中国人在完全没有必要的情况下卖弄英文.......我倒不是针对谁,只是大家都是中国人在讨论而且大家英语都差不到哪里去,何必呢?说了与学术无关的话.......管理员请扣分

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我们的目的是让懂汉语/中文的人看得懂,做好免疫组化。

现在世界上各个实验室里的中国人越来越多,到处都听得到中文,有的实验室里中文成了主要交流语言。
我们应当多说中文。

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