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HE染色中恼火的问题紧急求助

HE染色中恼火的问题紧急求助

几年来我一直用同样方法染色,最近3月来出现恼火的情况:
高倍镜下出现多多少少的细小水珠,时有时没有,影响切片质量.
我的染色程序是:
切片结束后60度温箱烤30至40分钟
二甲苯5分,二甲苯5分,95%酒精5分,90%酒精5分,80%酒精5分,苏木素8分,分化返蓝后水溶性尹红5分,水洗,80%酒精5分,90%酒精5分,95%酒精5分,无水精酒5分,无水精酒5分,电风吹干温度在50度左右放入二甲苯透明3分钟,二甲苯透明3分钟.潮时封片.

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染色原理很重要,时间太长,可以参考下面步骤:

二甲苯5分,二甲苯5分,100%酒精2分,95%酒精1分,90%酒精1分,80%酒精1分,水洗充分,苏木素3-5分,分化返蓝后水溶性尹红10秒-1分,80%酒精1分,90%酒精1分,95%酒精1分,无水精酒2分,无水精酒2分,二甲苯2分钟,二甲苯2分钟,潮时封片。

注意:封片动作要快,不要让呼出的水蒸气影响切片。

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回复 #2 benteng 的帖子

谢谢BENTENGE 回复,今天周一的片子还是出现上述情况,能否请丁老师帮帮忙,检查下我的染色程序给点建议.

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什么\

封片前二甲苯的时间是不是长了点啊!
我们一直是1分钟啊
在封片的时速度要快啊
避免呼气影响啊

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还有一种可能是树胶浓度太高了,流动不均匀所致.为什么要用电吹风吹呀?加一缸二甲苯就行了.感觉你烤片后所有的时间都太长了.

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首先请教“潮时封片”是何意思?其次,告送一个好办法,在二甲苯透明的第一道中加入一种试剂,可使天气潮湿片上沾的水气,脱的很干净。
crystal-yan-yan

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是不是那几天下雨呀,天气很潮

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真的是水珠吗?

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从理论上你的方法没什么不适,除了用电吹风不太规范外,但也不会出现水珠的现象。脱水时间长一点,二甲苯透明长一点都只有好处(只要颜色不褪色都可以)。我想你可以从其它方面找一下原因,比如树胶里有没有白色的东西,有时树胶里也有水进去。。。。。
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!

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谢谢各位的回复.现在注重水洗是否彻底好多了但还是在高倍镜下有少许水珠.在二甲苯透明前加一刚正丁醇可以吗?请丁老师再帮助分析一下原因,在下十分感激

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